北京中科白癜风医院爱心分享会 http://m.39.net/pf/a_5970332.html心肌缺血（myocardialischemia）是指心脏的血液灌注减少，导致心脏的供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。构建这种病态模型就是想让这种病态以动物的形式呈现出来，以此作为研究对象，着手解决人体上所面临的的问题。从理论上讲，模型要从发病机制和机理上贴近人体的发病情形。而今，从综合因素上来考虑，应该应用较多的动物就数大鼠及小鼠。从大小鼠身上我们可以有效的构建在体心肌全缺血（心肌梗死）、再灌注心肌缺血模型。从模型操作上来讲，其根本原理都是阻断左前降支冠状动脉，从而导致结扎处以下区域心肌缺血的目的。下面我就以心肌全缺血（心肌梗死）和再灌注心肌缺血这两部分来进行介绍。心肌全缺血顾名思义，致使缺血处心肌彻底缺血达到梗死的程度。动物大鼠一般选择SD大鼠；小鼠一般选择C57、ICR、KM、BABL/c等，其中C57和ICR应用上相对较多一些。试剂硫酸阿托品、舒泰?50、青霉素钠、2%TTC染液、4%多聚甲醛、苏木素?伊红染液。操作以小鼠为例进行说明。1、根据实验要求选择相应品系及体重的动物，提前12h禁食不禁饮备用。2、称量动物体重，根据体重换算，依次注射硫酸阿托品和舒泰?50，麻醉动物备用。3、剃除动物左胸侧被毛，并将动物固定于解剖板上，确认动物已无痛觉，酒精棉球擦拭剃毛处消*。4、剪开心脏搏动最强烈处皮肤，钝性扩张皮肤，暴露肌肉层，扩张胸大肌和胸间肌至第4肋骨处，右手持止血钳于第4肋骨处，穿破胸间肌并扩张肋骨，左手挤压胸部，使心脏蹦出；右手持心脏，左手持针线，沿左心耳沟下约1/3处穿过，结扎并送回心脏；心脏入腔后左手迅速按压胸腔排气，使胸腔内迅速恢复负压状态；缝合皮肤，放到恒温垫上观察动物状态。5、当动物苏醒后注80万U的射青霉素钠以防感染。将动物放回铺好垫料的洁净鼠笼内根据实验要求每日观察动物状态即可。6、根据实验要求可进行TTC染色，计算缺血面积。TTC染色前可将取出的心脏放入-40冰箱稍加冷冻，以方便切片。TTC染色37℃下10-15min即可染出，其中白色为缺血部位，红色为正常部位。7、根据实验要求将心脏取出后放入4%多聚甲醛固定，正常苏木素?伊红HE染色即可。再灌注心肌缺血顾名思义，使心肌短暂缺血后再恢复供血的一种方式。动物大鼠一般选择SD大鼠；小鼠一般选择C57、ICR、KM、BABL/c等，其中C57和ICR应用上相对较多一些。试剂硫酸阿托品、舒泰?50、青霉素钠、2%TTC染液、4%多聚甲醛、苏木素?伊红染液。操作以小鼠为例进行说明。8、根据实验要求选择相应品系及体重的动物，提前12h禁食不禁饮备用。9、称量动物体重，根据体重换算，依次注射硫酸阿托品和舒泰?50，麻醉动物备用。10、剃除动物左胸侧被毛，并将动物固定于解剖板上，确认动物已无痛觉，酒精棉球擦拭剃毛处消*。11、剪开心脏搏动最强烈处皮肤，钝性扩张皮肤，暴露肌肉层，扩张胸大肌和胸间肌至第4肋骨处，右手持止血钳于第4肋骨处，穿破胸间肌并扩张肋骨，左手挤压胸部，使心脏蹦出；右手持心脏，左手持针线，沿左心耳沟下约1/3处穿过，结扎前将要结扎部位放以软质物，打一活结并将活线留于体外（待需灌注时拉开活线即可松开结扎进行灌注）；送回心脏，左手迅速按压胸腔排气，使胸腔内迅速恢复负压状态；缝合皮肤，放到恒温垫上观察动物状态。12、当动物苏醒后注80万U的射青霉素钠以防感染。将动物放回铺好垫料的洁净鼠笼内根据实验要求每日观察动物状态即可。13、根据实验要求可进行TTC染色，计算缺血面积。TTC染色前可将取出的心脏放入-40冰箱稍加冷冻，以方便切片。TTC染色37℃下10-15min即可染出，其中白色为缺血部位，红色为正常部位。14、根据实验要求将心脏取出后放入4%多聚甲醛固定，正常苏木素?伊红HE染色即可。注意①小鼠的左前降支冠状动脉肉眼不可见，所以结扎时在一定意义上属于盲扎，需要一定的经验，刚着手时，如有条件可以借用呼吸机和心电图仪来实验；②手术结扎送回心脏后一定要排气，这个严重影响着动物的存活率，所以说这个至关重要；③大鼠心肌缺血同小鼠的唯一区别就是，小鼠可以凭借挤压胸部的力量使心脏蹦出，而大鼠需要借助止血钳夹取心脏的力量和挤压胸部的力量同时发力来完成，并且夹取大鼠心脏时切不可用蛮力，那样很容易致使心脏破裂，而导致实验失败。这个需要一定的联系来掌握适当的力度和技巧来完成。④大鼠心脏较大，左前降支冠状动脉肉眼可见，这是相对于小鼠来说独有的优点。⑤做心肌缺血再灌注时，结扎一定要打活结，活线一定要留在胸腔外，当要拉线的时候一定要轻，否则实验也极易失败。
左前降支冠状动脉
以下是造模后取出的离体心脏
以下是HE染色结果
以上为实验造模大致介绍，后续会上传实验操作视频！
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